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    常見問題
    • 凍存樣本的接收與存儲有哪些注意事項?
      1.細胞的凍存形態:請您在收到樣本時檢查凍存管中細胞的凍存形態,若凍存的細胞已融化,請您及時與我司聯系,以免耽誤后續實驗; 2.細胞的標簽信息:請您在確認細胞凍存形態正常時,確認細胞凍存管上面的信息,是否為您所需要的細胞類型、批次、規格; 3.存儲方式:如以上信息確認無異常,請您在收到細胞后,24h內不使用時,可將細胞暫存于-80℃冰箱內或者干冰中,若長時間不用請直接保存于液氮中。
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    • 如何安全的進行細胞復蘇?
      1.做好個人防護:在細胞復蘇之前,請您嚴格按照二級防護標準進行穿戴膠乳手套、口罩、防護服、護目鏡等個人防護裝備 2.排出液氮小技巧:對于存儲于液氮中的細胞,請用鑷子取出,先將凍存管帽擰松半圈再擰緊,或者放入-80℃冰箱中5min之后取出,來釋放進入凍存管中的液氮壓力。 3.樣本復蘇:將凍存管置于37℃水浴中,輕輕攪拌直至凍存管中剩余一微小冰晶時取出(時間盡量控制在2分鐘內,時間過長可能會造成細胞損傷風險)。水浴時注意不要讓凍存管蓋部分接觸水,以降低污染風險。復蘇完成后噴灑75%酒精迅速轉移至生物安全柜中進行后續的操作。
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    • 為什么PBMC不推薦使用臺盼藍染色?
      1.臺盼藍染色原理:活細胞不被染色呈現中心透亮,死細胞能被跨膜染成實心的藍色 2.臺盼藍染色的不足:1.臺盼藍染色時,原代細胞中的碎片、PBMC中殘留的紅細胞血小板等雜質碎片都可能被染色而被計數為死細胞;2.針對不同狀態的細胞,臺盼藍著色的程度也不同,臺盼藍對于死細胞能完全染色,對于狀態稍差的細胞也能部分著色而可能被標記為死細胞,從而導致計數活率與實際偏差較大(如下圖1)。3.臺盼藍放置時間過久易結晶,導致結晶物也容易被計數成死細胞而影響細胞計數的數量與活率 3.作為原代的PBMC,細胞懸液中會存在紅細胞血小板等碎片,且細胞狀態不一致,因此導致臺盼藍染色的計數結果與實際有較大偏差 1.圖片引用自中國生物器材網《臺盼藍、AO/PI熒光計數、明場計數染色法區別及所適用細胞樣品類型》
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